Acara GJUI 27 di hari ketiga semakin seru dengan adanya talkshow bersama 2 VTuber Indonesia, yaitu Andi Adinata dan Kanna Tamachi. Andi Adinata merupakan VTuber pria yang berafiliasi dengan MAHA5 (dibaca Mahapanca), ia melakukan debut pada Oktober 2019. Sedangkan Kanna Tamachi adalah VTuber Indonesia yang baru melakukan debut pada Oktober 2020. Kanna fasih berbahasa Inggris dan Indonesia. Konten YouTube-nya bermacam-macam, mulai dari mukbang, main game, bicara santai hingga konsultasi masalah.


Talkshow yang dipandu maskot GJUI Mutsuki dan Chiaki ini berlangsung santai, ringan namun menghibur penonton. Terlebih ketika topik pembicaraan menyinggung status ke-jomblo-an Andi, juga Kanna yang selalu semangat saat membicarakan makanan. Topik pembicaraan pun semakin meluas, mulai dari anime favorit, ide konten, hingga tips dari Andi dan Kanna untuk VTuber pemula.

Penampilan dari band Nap Project
Usai break sejenak, acara dilanjutkan dengan nonton bareng penampilan 3 pemenang band competition GJUI 27 yaitu Gacha (juara 1), Nap Project (juara 2), dan NBS (juara 3). Ketiga band membawakan sejumlah cover song lagu anime lawas dan terbaru dengan apik sehingga memukau para penonton yang memberikan pujiannya di kolom komentar.

LuSca
Kohi Sekai
Acara langsung dilanjutkan dengan penampilan bintang tamu grup idol dari Bandung LuSca, dan grup idol dari Yogyakarta, Kohi Sekai. Tak hanya membawakan lagu-lagu original mereka, LuSca dan Kohi Sekai juga membawakan lagu cover idol Jepang.
Selama 1 jam penampilan di hari ketiga GJUI 27, LuSca juga menyisipkan sesi bincang-bincang seputar perjalanan karir mereka selama 9 tahun terakhir. Sementara Kohi Sekai mengajarkan penontonnya untuk nge-chant bareng saat membawakan lagu mereka berjudul “Dear Friends”. Di akhir penampilannya, Kohi Sekai juga mengabarkan bahwa mereka akan segera merilis single baru, dan memberikan bocoran dengan melantunkan sedikit reff lagu tersebut.

DJ YurumiNation
Acara GJUI 27 resmi ditutup dengan OtaGroove dengan menampilkan 3 DJ Kazusa, YurumiNation, dan Lazurite.